347 roostevabast terasest keemiline koostis SARS-CoV-2 spetsiifilise T-raku vastuste venoosse või kapillaarvere suurus määrab immuunsuse COVID-19 suhtes.

Täname, et külastasite veebisaiti Nature.com.Kasutate piiratud CSS-i toega brauseri versiooni.Parima kasutuskogemuse saamiseks soovitame kasutada uuendatud brauserit (või keelata Internet Exploreris ühilduvusrežiim).Lisaks näitame pideva toe tagamiseks saiti ilma stiilide ja JavaScriptita.
Liugurid, mis näitavad kolme artiklit slaidi kohta.Kasutage slaidide vahel liikumiseks nuppu Tagasi ja Järgmine või igal slaidil liikumiseks lõpus olevaid slaidijuhtnuppe.

347 roostevabast terasest keemiline koostis

Roostevabast terasest 347 spiraaltoru keemiline koostis

Roostevabast terasest 347 spiraaltoru keemiline koostis ja mehaanilised omadused on järgmised:
- Süsinik – 0,030% max
- kroom – 17–19%
- nikkel – 8-10,5%
- Mangaan – max 1%

Roostevabast terasest 347 spiraaltoru mehaanilised omadused

Roostevabast terasest 347 spiraaltoru tootja sõnul on 347 spiraaltoru mehaanilised omadused:
- Tõmbetugevus (psi) – 75 000 min
- tootlikkuse tugevus (psi) – 30 000 min
- Pikenemine (% in 2 tolli) – 25% min
- Brinelli kõvadus (BHN) - 170 max

Roostevabast terasest 347 spiraaltoru rakendused ja kasutusalad

• Suhkrutehastes kasutatav roostevabast terasest 347 spiraaltoru.
• Roostevabast terasest 347 spiraaltoru, mida kasutatakse väetises.
• Tööstuses kasutatav roostevabast terasest 347 spiraaltoru.
• Roostevabast terasest 347 spiraaltoru, mida kasutatakse elektrijaamades.
• Roostevabast terasest 347 spiraaltoru, mida kasutatakse toiduainetes ja piimatoodetes.
• Nafta- ja gaasitehases kasutatav roostevabast terasest 347 spiraaltoru.
• Roostevabast terasest 347 spiraaltoru tootja, mida kasutatakse laevaehitustööstuses.

Arvatakse, et SARS-CoV-2-spetsiifilised T-rakud kaitsevad nakatumise ja COVID-19 progresseerumise eest, kuid selle kohta puuduvad otsesed tõendid.Siin võrdlesime SARS-CoV-2-spetsiifiliste interferoon-γ positiivsete T-rakkude täisvere mõõtmisi positiivsete COVID-19 diagnostilise testi tulemustega (PCR ja/või külgvool) 6 kuu jooksul pärast Liani verevõtmist.148 venoosse vereproove loovutanud osaleja hulgas oli SARS-CoV-2-spetsiifilise T-raku vastuse ulatus oluliselt kõrgem neil, kes jäid kaitstuks, kui nakatunutel (P <0,0001).% nakatumise risk, samas kui kõrge intensiivsus vähendas selle riski 5,4%-ni.Need tulemused üldistati veel 299 osalejale, kes testisid skaleeritavat kapillaarvere analüüsi, mis võis hõlbustada juurdepääsu populatsiooni skaala T-rakkude immuunsuse andmetele (14,9% vs. 4,4%).Seega võib SARS-CoV-2 spetsiifiliste T-rakkude mõõtmine ennustada nakkusohtu ja seda tuleks hinnata üksikisiku ja populatsiooni immuunseisundi jälgimisel.
SARS-CoV-2 infektsiooni immuunvastuse mõõtmine ja mõistmine on oluline tõhusate tulevaste strateegiate väljatöötamiseks, et minimeerida tulevaste COVID-19 puhangute mõju rahvatervisele ja majandusele.Immuunkorrelaatide tuvastamine annab olulist teavet elanikkonna vastuvõtlikkuse kohta viirusnakkustele, võib-olla varajase hoiatuse tipptasemel hospitaliseerimiste kohta ning võimaldab inimestel isiklikult hallata oma nakatumisriski ja teiste nakatamise ohtu.Immuunseire on osutunud kriitiliseks COVID-19 vaktsiinide tõhususe hindamisel tervetel ja kõrge riskiga patsientidel1,2,3, eriti SARS-CoV-24 mutantide puhul, ning immuunpuudulikkuse tuvastamine tähendab vajadust tugevdada immuunsust. Vaktsineerige ja vältige. tulevased puhangud.
Inimese immuunsuse tase SARS-CoV-2 nakkuse suhtes sõltub mitmest tegurist: viiruskoormus kokkupuute ajal, viiruse variandid, vanus, eelnev vaktsineerimise/infektsiooni staatus, kaasuvad haigused, ravimid ja mis kõige tähtsam, SARS-CoV-vastane infektsioon .2 adaptiivne immuunvastus tekib viirusega kokkupuute ajal5.SARS-CoV-2 infektsiooni ja/või vaktsineerimise immuunvastuse hindamine on keskendunud seroloogilistele analüüsidele, mis mõõdavad struktuurvalgu (nt spike-glükoproteiini) suhtes spetsiifiliste antikehade olemasolu.Kuid antikehade olemasolu või puudumine üksi ei määra täpselt kaitsvat immuunvastust, kuna vastused on aja jooksul oluliselt nõrgenenud6 ja SARS-CoV-2 variantide neutraliseerimine taastuvatel või topeltvaktsineeritud isikutel Nõrk aktiivsus, mis võib põhjustada läbimurdeinfektsioonide arv7.Tõepoolest, kaitse Omicroni variandi (B.1.1.529) põhjustatud sümptomaatilise COVID-19 vastu vähenes pärast 4–6-kuulist mRNA-ga vaktsineerimist ligikaudu 10%-ni, kuigi kaitse raske haiguse vastu püsis >68% vähemalt 7 kuud8.Adaptiivsete mälu T-rakkude reaktsioonide mõõtmine, mis pakuvad pikaajalist kaitset viirusnakkuse eest, on parim indikaator vastuvõtlikkuse kohta SARS-CoV-2 infektsioonile ja seega näitab paremini COVID-199 positiivse testimise riski, kuna spetsiifiline T rakud võivad infektsiooni ära hoida.ilma serokonversioonita10,11.T-raku vastuste mõõtmine on aga pälvinud vähem tähelepanu metoodiliste raskuste ja logistiliste probleemide tõttu veenivere proovide võtmisel ja transportimisel, eriti kui tehakse suuri vaatlusuuringuid vaktsiini efektiivsuse hindamiseks ja immuunsuse jälgimiseks.Vaktsineeritud isikutel on aga tugev T-rakkude aktiivsus SARS-CoV-2 variantide vastu, mis võib COVID-1912,13 raskusastme piiramiseks kompenseerida antikehade reaktiivsuse kadu.
Siin püüdsime mõista, kas SARS-CoV-2 T-raku vastuse ühekordne mõõtmine võib ennustada SARS-CoV-2 infektsiooni absoluutset riski 6 kuu jooksul pärast vereproovi võtmist, sõltumata varasematest immuunsüsteemi mõjutavatest teguritest.Selleks, et muuta T-rakkude test suure läbilaskevõimega ja rakendatavaks suuremate uuringute jaoks, proovisime testi muuta ka miniatuurseks, et seda saaks teha kapillaarse sõrmepulga vereproovi kasutades.
Mõõtsime tervetel doonoritel rakulisi ja humoraalseid immuunvastuseid, kasutades SARS-CoV-2 T-rakkude ja IgG antikehade kombineeritud tuvastamist täisveenivere põhjal (osalejate tunnuste kohta vt märts 2022 14. Vaktsineeritud doonoritel SARS-CoV-2- spetsiifilised T-rakulised vastused määrati plasma interferoon-y (IFN-y) taseme mõõtmisega pärast täisvere stimuleerimist SARS-CoV-2 peptiidiga (nagu varem, viited 14, 15, 16, 17, 18) ja sellega seotud IgG vastuseid. nukleokapsiidiga (N) suurenes neil, kes teatasid varasemast infektsioonist, kuigi mõlemad vastused olid kõrgemad varem nakatunud vaktsineerimata doonoritel, kehas maksimaalne (joonis 1a, b). IgG vastused spike-glükoproteiinide (RBD, S1, S2) vastu olid kõrgeimad varem nakatunud vaktsineeritud doonoritel (joonis 1c – e).
SARS-CoV-2-spetsiifilisi IFN-y+ T-raku vastuseid mõõdeti venoosse täisvere analüüsiga ning see põhines osalejate vaktsineerimisel ja eelneval SARS-CoV-2 nakkuse staatusel (kinnitatud PCR-i ja/või lateraalvoolu testiga). + /Inf +' n = 60 (roheline), "Vac + /Inf-" n = 82 (sinine), "Vac-/Inf +" n = 4 (kollane), "Vac-/Inf-" n = 1 (ei rakendata).SARS-CoV-2-spetsiifilised IgG sidumisreaktsioonid on suunatud nukleokapsiidile ("N") (b; ****P < 0,0001, **P = 0,0016), teravdatud retseptoriga seondumisdomeeni ("RBD") (c; ** P = 0,0022, *P < 0,015), spike-alaühik 1 ("S1") (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac-) /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) ja tipp-alaühikut 2 ("S2") (e) mõõdeti venoosse täisvere analüüsiga ning see põhines osalejate vaktsineerimisel ja eelneval SARS-CoV-2 (kinnitatud PCR ja/). või lateraalvoolu test) nakkuslik seisund.'Vac + /Inf +' n = 60 (roheline), 'Vac + /Inf-' n = 71–82 (sinine), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kollane).Võrdlused viidi läbi Kruskal-Wallise testiga, mida kohandati mitme võrdluse jaoks Dunni testiga.Andmed kuvatakse diagrammidena (keskjoon mediaanil, ülemine piir 75. protsentiili juures, alumine piir 25. protsentiili juures), mille minimaalse ja maksimaalse väärtuse juures on vurrud.Iga punkt tähistab doonorit.Toorandmed esitatakse algandmefailide kujul.
Pärast vereproovide võtmist paluti osalejatel ise teatada COVID-19 positiivsetest PCR ja/või külgvoolu testi tulemustest;kui osalejate test oli positiivne ajavahemikus 1. september 2021 kuni 29. detsember 2021, eeldati, et nad on pärast 29. detsembrit 2021 nakatunud Delta (B.1.617.2) koronaviiruse variandi ja Omicroniga (B.1.1.529) Walesi rahvatervisega. see murevõimalus muutub domineerivaks.148 hinnatava doonori hulgas täheldasime 6 kuu jooksul pärast vereloovutamist nakatumise määra 26,3% (39/148), kellest 38 said teise või kolmanda annuse COVID-19 vaktsiini (nakkuse läbimurre toimus pärast Pfizer/BioNTechi ( BNT162b2) mRNA vaktsiin või AstraZeneca vaktsiin (ChAdOx1 nCoV-19));nakatus ka vaktsineerimata doonor.SARS-CoV-2-spetsiifiliste IFN-y-positiivsete T-rakkude vastuste ulatus oli oluliselt madalam neil, kes teatasid positiivsest COVID-19 diagnostilisest testist, kui nakatumata doonoritel (P < 0,0001; joonis 2a), peamiselt seetõttu, et T-raku vastuste optimaalne indutseerimine vaktsineerimisega mõnel osalejal (P = 0, 050; täiendav joonis 1).IFN-γ+ T-raku vastuse suuruse ja positiivse COVID-19 testi tulemuseni kulunud aja vahel puudus korrelatsioon (täiendav joonis 2).Seevastu ei RBD-, S1-, S2-siduvate IgG-vastuste (joonised 2b–d) ega RBD-, S1-neutraliseerivate antikehade vastused ei olnud spetsiifilised metsiktüüpi ega delta-SARS-CoV-2 (B.1.617) suhtes.) (täiendav joonis 3) suudab eristada inimesi, kellel on oht nakatuda.Kuid madalad N-seotud IgG vastused SARS-CoV-2 vastu korreleerusid COVID-19 nakkuse riskiga (P = 0,0084; joonis 2e);need, kelle test oli positiivne, oli 85% vähem tõenäoline (P = 0,00035; VÕI 0,15, 95).% CI: 0,047–0,39 (täiendav joonis 4).
Tervetelt doonoritelt (n = 148) võetud veenivereproovid hindasid SARS-CoV-2-spetsiifilisi IFN-γ+ T-raku vastuseid (a; ****P < 0,0001) ja Spike'i retseptori seondumist spetsiifilise SARS-CoV-ga. -2 stiimulit.domeen (RBD) (b), 1. teraviku alaühik ("S1") (c), 2. teraviku alaühik ("S2") (d) ja nukleokapsiid ("N") (e; **P = 0,0084) .Tuvastati osalejad, kelle COVID-19 test oli positiivne (PCR ja/või külgvool);kõik infektsioonid tekkisid 6 kuu jooksul pärast vereproovi võtmist.Võrdlused tehti kahepoolse Mann-Whitney testi abil.Andmed kuvatakse diagrammidena (keskjoon mediaanil, ülemine piir 75. protsentiili juures, alumine piir 25. protsentiili juures), mille minimaalse ja maksimaalse väärtuse juures on vurrud.Iga punkt tähistab doonorit.ns pole oluline.Soojuskaart f näitab Spearmani auaste korrelatsioone määratud andmekogumi muutujate vahel.Võrdlused, mis ei olnud statistiliselt olulised, jäeti maatriksist välja ja märgiti tühjade lahtritega.Toorandmed esitatakse algandmefailide kujul.
Eelseadistatud diagnostiline positiivne piirväärtus 14 peeti liiga meelevaldseks, et hinnata uuesti nakatumise riski, mistõttu määrati absoluutsete riskiparameetrite määramiseks kvartiilide vahemikud.Statistiline mudel, mis hõlmas ainult neid muutujaid, millel oli tulemustele oluline mõju, näitas, et SARS-CoV-2-spetsiifilise IFN-y+ T-raku vastuse suurus oli kõige olulisem immuunbiomarker indiviidi tõenäosuse kindlakstegemiseks. testitud COVID-i suhtes.-19 positiivne (joonis 2f ja täiendav joonis 4).SARS-CoV-2 spetsiifilise IFN-y+ T-raku vastusega patsiendid kolmandas (194-489 pg/ml IFN-y) ja neljandas (>489 pg/ml IFN-y) kvartiilis 65% (P = 0,055; VÕI 0,35, 95% CI: 0,11–1,00) ja 90% (P = 0,0050; VÕI 0,098, 95% CI: 0,014–0,42) oli rohkem osalejaid.Tõenäosus on väike (täiendav joonis 4).Üldiselt oli osalejatel, kelle SARS-CoV-2 spetsiifiline T-raku vastus veeniverest ≤79 pg/ml IFN-y, 6 kuu möödudes 43,2% läbimurdeinfektsiooni risk, võrreldes vastusega >489 pg/ml.ml IFN-y nakatumise risk oli 5,4% (tabel 2).
Venoosse täisvere analüüsi ulatus on piiratud, kuna flebotoomist peab proovi võtma.SARS-CoV-2 T-rakkude ja IgG testimise kättesaadavuse suurendamiseks on välja töötatud alternatiivne kapillaarvereproovide võtmise meetod, mis võimaldab osalejatel võtta kodus sõrmepulgast vereproove.Meie teadmiste kohaselt ei ole varasemaid teateid antigeenispetsiifiliste T-rakkude funktsiooni mõõtmise kohta kapillaarvereproovides.Varem on näidatud tugevat korrelatsiooni võrreldavate kapillaar- ja venoossete vereproovide abil saadud lümfotsüütide arvu vahel.Lisaks on teatatud, et SARS-CoV-2-spetsiifiliste T-rakkude vastuseid mõõtvates täisverepõhistes analüüsides kasutatakse ainult 320 µl venoosset verd20, mis kõrvaldab mured T-eeslasrakkude esinemissageduse pärast kapillaarvereproovides.
Kasutasime seda SARS-CoV-2 T-rakkude ja IgG-antikehade suure läbilaskevõimega standardiseeritud koostöötesti, mis põhinevad kapillaar-täisverel, et mõõta rakulist ja humoraalset immuunvastust erinevate kaasuvate haiguste ja eelneva vaktsineerimise/nakkuse staatusega osalejatel (tabel 1).värvati kogu Ühendkuningriigist ajavahemikul 24. jaanuarist 14. märtsini 202214. Enamik (90,9%) sõrmeproovidest võeti õigesti ja saadeti laborisse 24 tunni jooksul pärast kogumist.Mõnel juhul saadi proovid 48 tunni jooksul pärast verevõttu, kuid ükski neist proovidest ei läbinud kvaliteedikontrolli ega mõjutanud üldist T-rakkude või antikehade mõõtmist (täiendav joonis 5).Kuigi mõnedel inimestel esines erinevusi SARS-CoV-2-spetsiifilise IFN-y+ T-raku vastuse ulatuses, mõõdetuna vastavates kapillaar- ja venoosse vereproovis, ei esinenud olulisi erinevusi üldiselt (P = 0,88; täiendav joonis 6 ).).
SARS-CoV-2-spetsiifilised IFN-y+ T-raku vastused suurenesid märkimisväärselt vaktsineeritud isikutel, kes teatasid ka varasemast infektsioonist (P = 0,0001), kuid mitte oluliselt kõrgemad kui varem nakatunud vaktsineerimata doonoriisikutel (P = 0,19, joonis 1). 3a).).IgG vastused spike-glükoproteiini (RBD, S1, S2) vastu olid vaktsineeritud doonoritel oluliselt kõrgemad kui vaktsineerimata doonoritel, sõltumata eelnevast nakatumise staatusest (joonis 3b-d).Huvitav on see, et keskmine N-seotud IgG vastus oli kõrgeim varem nakatunud vaktsineerimata osalejatel võrreldes vaktsineeritud osalejatega, kuigi see ei saavutanud tähtsust (joonis 3e).Vaktsineerimata ja nakatumata doonoritest, kes andsid end teada, oli 15 osalejal 37-st (40,5%) N-seotud IgG suhtes positiivsed, ületades eelnevalt kehtestatud läve 2,0 BAU/ml14;need 15 osalejat Kaheteistkümnel neist patsientidest osutus IFN-y+ T-raku vastuse suhtes positiivne tulemus, mis ületas eelnevalt kehtestatud läve 22,7 pg/ml IFN-y14.Seetõttu on tõenäoline, et need osalejad olid varem SARS-CoV-2-ga nakatunud ja neid ei testitud COVID-19 suhtes isikliku valiku, PCR-i ja/või külgvoolu seadmete puudumise tõttu või nad olid asümptomaatilised.Kuigi vaktsineerimata doonoritel esines märkimisväärne korrelatsioon T-rakkude vastuste vahel IFN-y+ ja N-seotud IgG taseme vahel (P = 0,0044; lisajoonis, N-seotud IgG vastus vähenes kiiremini kui N-seotud IgG vastus, samas kui IFN-y + T-rakkude vastused säilisid olenemata vaktsineerimise staatusest, kuigi doonorite arv 50 nädalat pärast nakatamist oli väike (täiendav joonis 8). Vaktsineerimise tüüp oli üldiselt vähe erinev SARS-CoV-2, T suhtes spetsiifiliste IgG vastuste osas. rakud ja RBD-ga seotud, kuigi osalejad, kes said kaks annust BNT162b2 ja sellele järgnes mRNA1273 revaktsineerimine, näitasid oluliselt kõrgemat IFN-y + T-rakkude taset, olid SARS-CoV-2 suhtes tundlikumad kui need, kes said kahte annust ChAdOx1 ja BNT162b2 (täiendav Joonis fig 9) Lisaks oli teatatud kaasuvatel haigustel vähene üldine erinevus täheldatud T-rakkude vastustes võrreldes tervete doonoritega (täiendav joonis 10).
SARS-CoV-2-spetsiifilisi IFN-y+ T-raku vastuseid mõõdeti täisvere kapillaaranalüüsiga ja need põhinesid osalejate vaktsineerimisel ja eelneval SARS-CoV-2 nakkuslikul staatusel (kinnitatud PCR-i ja/või külgvoolu testiga)."Vac + /Inf +" n = 42 (roheline), "Vac + /Inf-" n = 158 (sinine), "Vac-/Inf +" n = 33 (kollane), "Vac- /Inf-" n = 37 (hall).****P < 0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac-/Inf-) P = 0,014 .SARS-CoV-2-spetsiifilised IgG seondumisreaktsioonid terava retseptori sidumisdomeeniga (RBD) (b; ****P < 0,0001, ns: mitteoluline), terava alaühikuga 1 ("S1") (c; * * **P < 0,0001, ns: ei ole oluline), 2. teravikalaühik ("S2") (d; ****P < 0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016) ja nukleokapsiid ("N") (e; ****P < 0,0001, ns ei ole oluline) mõõdeti venoosse täisvere analüüsiga ning põhines osalejate vaktsineerimisel ja eelneval SARS-CoV-2 (kinnitatud PCR ja/või lateraalvoolu analüüsiga). Infektsioonid jaotati olek."Vac + /Inf +" n = 46 (roheline), "Vac + /Inf-" n = 182 (sinine), "Vac-/Inf +" n = 34 (kollane), "Vac-/Inf-" n = 37 (hall).Võrdlused viidi läbi Kruskal-Wallise testiga, mida kohandati mitme võrdluse jaoks Dunni testiga.Andmed kuvatakse diagrammidena (keskjoon mediaanil, ülemine piir 75. protsentiili juures, alumine piir 25. protsentiili juures), mille minimaalse ja maksimaalse väärtuse juures on vurrud.Iga punkt tähistab doonorit.Toorandmed esitatakse algandmefailide kujul.
Nagu varemgi, paluti osalejatel teatada COVID-19 positiivsetest PCR-i ja/või külgmise verevoolu tulemustest;Ühendkuningriigi terviseagentuuri andmetel eeldati, et osalejad olid positiivse viirusevariandi testimise ajal nakatunud Omicroni koroonaviirusega (B.1.1.529), kuna see oli uuringuperioodil Ühendkuningriigis domineeriv variant.299 hinnatava doonori hulgas täheldasime kolme kuu jooksul pärast kapillaaride annetamist nakatumismääraks 8,0% (24/299), millest seitse ei olnud vaktsineeritud.Kaasushaiguste osakaal kõigi osalejate seas oli madalam neil, kelle test oli COVID-19 suhtes positiivne (10,7%) kui neil, kelle test oli COVID-19 suhtes negatiivne (24,4%, tabel 1), mis võib olla tingitud asjaolust, et osalejad, kellel oli teatud test haigused on ettevaatlikumad ja kaitsevad võimalike tagajärgede eest, nagu diabeet ja vähk.Nagu täheldati venoosse vere kohordis, mõõdeti SARS-CoV-2-spetsiifilised interferoon-y (IFN-y)-positiivsed T-rakud nende isikute kapillaarvereproovides, kes teatasid positiivsest COVID-19 diagnostilisest testist.Vastuse suurus oli oluliselt madalam kui nakatamata doonoritel (P = 0, 034; joonis 4a), kuna vaktsineerimise ja/või eelneva infektsiooniga indutseeriti T-raku vastus suhteliselt halvasti (täiendav joonis 11).Samamoodi ei olnud ei RBD-, S1-, S2-siduvate IgG-vastuste (joonised 4b–d) ega RBD-, S1-neutraliseerivate antikehade vastused spetsiifilised metsiktüüpi ega delta-SARS-CoV-2 suhtes (B. 1.617).(Täiendav joonis 12).Isikuid, kellel on märkimisväärne nakkusoht, saab tuvastada.Erinevalt venoossest kohordist ei erista N-ga seotud IgG vastused ka COVID-19 riski (joonis 4e), mis viitab sellele, et Omicroni variant (B.1.1.529) suurendab immuunvastusest kõrvalehoidmist varem nakatunud isikutel, nagu hiljuti kirjeldatud 21. Seevastu SARS-CoV-2-spetsiifilise IFN-y T-raku vastuse tugevus oli jällegi kõige olulisem muutuja COVID-19 positiivse testimise individuaalse tõenäosuse määramisel (joonis 4f).Üldiselt oli osalejatel, kelle SARS-CoV-2-spetsiifiline kapillaar-T-raku vastus oli ≤23,7 pg/ml IFN-y, kolme kuu pärast nakatumise risk 14,9%, võrreldes vastusega >141,6 pg/ml.ml IFN.-γ nakatumise risk oli 4,4% (tabel 2).
IFN-y+ T-raku vastused, mis on spetsiifilised SARS-CoV-2 (a; *P = 0,034) ja SARS-CoV-2 spetsiifilise IgG-sihitud retseptorit siduva domeeni (RBD) (b), terava alaühiku 1 (' S1') (c), spike subühik 2 ('S2') (d) ja nukleokapsiidi sidumisreaktsioon ('N') (e).COVID-19 testides (PCR ja/või külgmise verevoolu test) positiivseks tunnistatud osalejad leidsid kõik infektsioonid 3 kuu jooksul pärast vereproovi võtmist.Võrdlused tehti kahepoolse Mann-Whitney testi abil.Andmed kuvatakse diagrammidena (keskjoon mediaanil, ülemine piir 75. protsentiili juures, alumine piir 25. protsentiili juures), mille minimaalse ja maksimaalse väärtuse juures on vurrud.Iga punkt tähistab doonorit.ns pole oluline.Soojuskaart f näitab Spearmani auaste korrelatsioone määratud andmekogumi muutujate vahel.Võrdlused, mis ei olnud statistiliselt olulised, jäeti maatriksist välja ja märgiti tühjade lahtritega.Toorandmed esitatakse algandmefailide kujul.
COVID-19 pandeemia järgmisse faasi liikudes nihkub fookus ennetamiselt individuaalsele riskijuhtimisele ja haavatavate ühiskonnaliikmete tuvastamisele.Nende kõrge riskiga rühmade tõhusaks tuvastamiseks ja ravimiseks on ülioluline määrata kindlaks immuunsuse korrelatsioonid COVID-19 suhtes.Nüüd on üha rohkem tõendeid selle kohta, et T-rakuline immuunsus kaitseb SARS-CoV-2 nakkuse eest ja piirab COVID-1910 tõsidust.Siin esitatud andmed näitavad, et SARS-CoV-2-spetsiifiliste IFN-y+ T-raku vastuste kombineeritud tugevus teravate, membraanide ja nukleokapsiidi struktuurvalkude vastu annab COVID-19 vastu suurema kaitse kui antikehade seondumine.19 soodustab või neutraliseerib vastuseid. .ning seda tuleks individuaalse ja/või karja immuunsuse hindamisel arvesse võtta.RNA viirused, nagu SARS-CoV-2 või A-gripiviirus (IAV), väldivad seroloogilist neutraliseerimist, arendades kiiresti eksponeeritud B-raku epitoope antikehade poolt äratuntavatel pinnaantigeenidel.T-rakkude poolt pakutav kaitsev immuunvastus võib peegeldada epitoopide sihtimist viirusvalkude konserveeritumatest piirkondadest, mis ei suuda immuunvastusest kiiresti pääseda.T-rakkude poolt vahendatud kaitse uudsete SARS-CoV-2 variantide vastu on sarnane heterosubtüüpilise kaitsega, mida vahendab konserveerunud sisemiste valkude T-raku sihtimine IAV22, 23 alatüüpides.
Vaatamata tohutule potentsiaalile rakulise immuunvastuse mõõtmiseks COVID-19 suhtes, on täpsete, suure läbilaskevõimega standardiseeritud T-raku analüüside väljatöötamisele pööratud suhteliselt vähe tähelepanu.T-raku vastuste mõõtmisega seotud traditsiooniline keerukus ja kulud välistavad T-raku immuunsuse täpse määramise suure populatsiooni immuunsuse skriinimisel.Kuigi hiljuti on saadaval mitmed kaubanduslikud täisvere peptiidide stimuleerimise testid, vajavad kõik praegu vere saamiseks flebotoomi, mis piirab kättesaadavust ja ulatust.Kapillaarvere süsteeme kasutatakse laialdaselt SARS-CoV-2 antikehade levimuse määramiseks populatsioonis.Kohandasime kapillaarvere analüüse täisvere peptiidide stimuleerimise testide tegemiseks, et hinnata T-rakkude reaktsioonivõimet SARS-CoV-2 struktuurvalkude ja SARS-CoV-2 spetsiifiliste antikehade vastuste suhtes.Tegelikult on SARS-CoV-2-spetsiifiliste antikehade ja T-rakkude kombineeritud mõõtmine samas kapillaarvereproovis väga atraktiivne: (i) vähendab vajadust teha mitu vereanalüüsi osaleja kohta, (ii) parandab osaleja kogemust ja arusaamist;(iii) parandada logistikat ja vähendada dubleerimist, (iv) vähendada keskkonnamõju, kuna on vaja vähem laboritarvikuid ja proovide kohaletoimetamist.Kuigi üldine IFN-y reaktiivsus oli sobitatud venoosse ja kapillaarvere proovide puhul sarnane, täheldati, et see oli osalejate kapillaarvere kohordis (joonis 4a) madalam kui venoosse vere kohordis (joonis 2a).IFN-y väärtused Sellel leiul on mitu selgitust, nimelt võeti kapillaarvere proovide võtmise rühma (tabel 1) ja veresoontest saadud T-rakkude elujõulisus ja/või funktsioon. proovid võivad olla madalad, eriti võttes arvesse proovide pikaajalise säilitamise tingimusi enne peptiidstimulatsiooni.
Praegu laialdaselt saadaval olev COVID-19 vaktsiin pakub enamikule retsipientidele parimat kaitset raskete haiguste vastu 6 kuu jooksul pärast vaktsineerimist8.Julgustavalt, vaatamata SARS-CoV-26,7 variantide halvale vaktsiinist põhjustatud seroloogilisele neutraliseerimisele, jäid metsiktüüpi SARS-CoV-2 vastu vaktsineerimisel esile kutsutud T-rakulised vastused väga reaktiivseks, kuna tekkis 25 teist.Siin esitatud andmed näitavad vaktsiini immunogeensuse laiema hindamise tähtsust, tuues esile ebapiisava T-rakulise immuunsusega vaktsiinid, et vältida äkilist nakatumist ja viiruse püsivat edasikandumist.Samuti täheldasime, et paljudel kapillaaride rühma värvatud vaktsineerimata isikutel oli SARS-CoV-2-spetsiifiliste T-rakkude (ja N-siduva IgG) märkimisväärne vastus sõltumata varasemast vaktsineerimisest, mis on tõenäoliselt tingitud varasemast nakatumisest.Sobivate isikute vaktsineerimise asemel tuleks hinnata nende nakatumisohtu nende praeguse immuniseerimisstaatuse ja tehtud teadlike valikute põhjal.
Selle uuringu piirangud hõlmavad kindlustunnet, et osalejad teatasid ise SARS-CoV-2 nakatumisest pärast verevõtmist, et määrata immuunsuse asjakohasus;mõnel osalejal võib olla asümptomaatiline infektsioon ja nad ei saa läbida COVID-19 PCR-i ja/või külgvoolu testi.Meie andmekogumil puudus ka teave osalejate ravimite kohta vereproovide võtmise ajal.Lisaks, arvestades, et kõik meie osalejad teatasid ainult kergetest/mõõdukatest sümptomitest või sümptomite puudumisest, ei olnud meie andmekogumist võimalik tuvastada immuunvastuseid, mis ennustasid COVID-19 tõttu suurenenud raske haiguse ja haiglaravi riski.Kuid CD8+ T-raku vastuste olemasolu nukleokapsiidispetsiifiliste epitoopide vastu on hiljuti seostatud kaitsega raske COVID-1926 vastu.Lisaks ei mõõtnud siin kasutatud test T-rakkude vastuseid spetsiifilistele varakult ekspresseeritud SARS-CoV-2 mittestruktuursetele valkudele, mis on hiljuti näidanud, et need akumuleeruvad eelistatavalt seronegatiivsetel tervishoiutöötajatel, kes on olnud kontaktis nakatunud patsientidega.Selle töö põhjal, võttes arvesse kogukonna levimust värbamise ajal ja kontaktnakkuse suurt tõenäosust populatsioonis, näib meie testides leitud SARS-CoV-2 spetsiifiliste T-rakkude arv samuti olevat võimeline kliirens olema.subkliinilised infektsioonid meie kohortides.Lõpuks ei mõõtnud me T-rakkude interleukiin 2 tootmist, kuna meie eelmine töö näitas SARS-CoV-214-spetsiifiliste T-rakkude vastuste halba tuvastamist, kuigi IL-2-spetsiifilised vastused võivad viidata olemasolevale ristreaktiivsusele.rakud, mis on seotud kaitsega SARS-CoV-211 nakkuse vastu.
Kokkuvõttes toovad need andmed esile põhivajaduse pikaajaliste pikisuunaliste uuringute järele, mis hõlmavad SARS-CoV-2-spetsiifilisi T-raku vastuseid populatsiooni ulatuse immuunsuse mõõtmiseks.Neid jõupingutusi võib aidata uue kapillaarvere testi väljatöötamine, mis mõõdab T-rakkude vastust.
Uurimisprojekti värbas osalejaid 2021. aasta veebruarist 2022. aasta märtsini. Veenivere proove loovutanud tervete doonorite kohort (n = 148) koosnes peamiselt ülikooli töötajatest ja Cardiffi ülikooli COVID-19 sõeluuringus osalevatest üliõpilastest või aasta algkooli personalist. Cardiff.Kõik osalejad olid muidu terved ega teatanud immunosupressiivsete ravimite võtmisest (omadused on toodud tabelis 1).Kapillaarvereproove loovutanud osalejate rühma kuulusid kõik vabatahtlikud doonorid (vanuses 18+) üle Ühendkuningriigi.Ajavahemikus 24. jaanuarist 14. märtsini 2022 osales uuringus 342 osalejat, kellest 299 esitasid laborisse vereproovid.Paljud osalejad jäid vaktsineerimata ja/või teatasid tõsistest kaasuvatest haigustest, sealhulgas autoimmuunhaigustest ja vähist (tunnuste kohta vt tabelist 1).See uuring sai eetilise heakskiidu Newcastle'i ja North Tyneside 2 teadusuuringute eetikakomiteelt (ID IRAS: 294246) ja Cardiffi ülikooli meditsiinikooli teadusuuringute eetikakomiteelt (SREC viide: SMREC 21/01).Kõik osalejad andsid enne kaasamist kirjaliku teadliku nõusoleku.Osalejad ei saanud selles uuringus osalemise eest hüvitist.
Venoosse vereproovid saadi veenipunktsiooniga 6 või 10 ml liitium- või naatriumhepariinivacutaineritesse (BD).Kapillaarvereproovid võeti sõrmelantsetiga ja koguti seejärel hepariini mikrokonteineritesse (BD).Vaja on vähemalt 400 µl verd;sellest kogusest väiksemad proovid lükatakse tagasi.Muud proovi tagasilükkamise põhjused hõlmasid massilist koagulatsiooni ja/või hemolüüsi ning viskoosse plasma analüüsiks kogumise ebaõnnestumist (täiendav joonis 5).Antikehade vastuste hindamiseks oli saadaval kokku 299 kapillaarvereproovi, millest 270 proovi oli saadaval ka T-raku vastuste hindamiseks.
SARS-CoV-2 spetsiifilisi T-raku vastuseid hinnati COVID-19 Immuno-T testiga (ImmunoServ Ltd) ja viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud14.Lühidalt, igalt osalejalt võeti üks 6 ml või 10 ml naatriumhepariini (BD) venoosne vakutainer ja töödeldi laboris 12 tunni jooksul pärast verevõtmist.Kuigi enamik proove töödeldi 24 tunni jooksul, koguti üks 400–600 μl hepariniseeritud mikroverejooksu (BD) kapillaarveri 48 tunni jooksul pärast sõrmepulgaproovi võtmist.Venoosseid ja/või kapillaarvere proove stimuleeriti eraldi SARS-CoV-2 (metsiktüüpi variant) spetsiifiliste peptiidide kogumitega, nagu eelnevalt kirjeldatud14.See peptiidide raamatukogu sisaldab 420 15-meerilist järjestust 11 kattuva aminohappega, mis katavad kogu teravikvalku (S1 ja S2) (S; NCBI valk: QHD43416 1), nukleokapsiidi fosfoproteiini (NP; NCBI valk: QHD43423 2) ja membraani (Mglükoprotein) NCBI valk: QHD43419 1) kodeerivad järjestused (viidatud kui "S-/NP-/M-kombinatoorse peptiidi raamatukogu").Kõik peptiidid puhastati kuni > 70%, lahustati steriilses vees ja kasutati lõppkontsentratsioonis 0,5 μg/ml peptiidi kohta.Proove inkubeeriti 37 °C juures 20-24 tundi.Seejärel tsentrifuugiti tuube 5000 x g juures 3 minutit ja iga vereproovi pealt koguti ~150 µl plasmat.Enne tsütokiinide/antikehade tuvastamise testide tegemist hoidke plasmaproove kuni üks kuu temperatuuril -20 °C.
IFN-y mõõdeti IFN-y ELISA MAX Deluxe Set (BioLegend, katalooginumber 430116) abil ja viidi läbi vastavalt tootja juhistele.Vahetult pärast stopplahuse (2N H2SO4) lisamist loeti mikroplaati 450 nm juures, kasutades BioLegend Mini ELISA plaadilugejat.IFN-y kvantifitseeriti standardkõvera ekstrapoleerimisega, kasutades GraphPad Prism.Analüüsi alumist avastamispiiri allapoole jäävateks väärtusteks registreeriti 7,8 pg/ml, analüüsi ülemisest avastamispiirist kõrgemad väärtused 1000 pg/ml.
Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG antikehad mõõdeti Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-plex paneeli (Bio-Rad, kat. nr 12014634) abil ja märgistati vastavalt tootja juhised.juhised.Proove, mille väärtus ületas kvantifitseerimispiiri, analüüsiti uuesti lahjendusega 1:1000.Helmeste keskmine fluorestsentsi intensiivsus mõõdeti Bio-Plex 200 instrumendiga (Bio-Rad).Antikehade kontsentratsioonid arvutati VIROTROL SARS-CoV-2 üksikkontrollanalüüsiga (Bio-Rad) ja konverteeriti WHO/NIBSC 20/136 rahvusvaheliseks võrdlusstandardi ühikuks (BAU/mL), kasutades tootja kalibreerimistegurit.
SARS-CoV-2 metsiktüüpi ja delta (B.1.617) SARS-CoV-2 liinide vastaseid RBD ja S1 subühikuspetsiifilisi neutraliseerivaid antikehi mõõdeti Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 Variant Neutralization Antibody Kit (Bio) abil. -Rad , osa nr 12016897), vastavalt tootja juhistele.Mõõtke Bio-Plex 200 (Bio-Rad) keskmine fluorestsentsi intensiivsus ja arvutage inhibeerimise protsent (st neutraliseerimine) järgmise valemi abil:
SARS-CoV-2 nakkusliku neutraliseerimise testid viidi läbi nagu eelnevalt kirjeldatud28.Lühidalt, 600 PFU metsiktüüpi SARS-CoV-2 inkubeeriti 3-kordse plasma seerialahjendusega kahes korduses 1 tund temperatuuril 37 °C.Seejärel lisati segu 48 tunniks VeroE6 rakkudele.Monokihid fikseeriti 4% paraformaldehüüdiga, permeabiliseeriti 0,5% NP-40-ga ja inkubeeriti 1 tund blokeerimispuhvris (PBS, mis sisaldas 0,1% tweeni ja 3% lõssi).Primaarne antikeha (anti-nukleokapsiid 1C7, Stratech) lisati blokeerimispuhvrile 1 tunniks toatemperatuuril.Pärast pesemist lisati blokeerimispuhvrile 1 tunniks sekundaarne antikeha (hiirevastane IgG-HRP, Pierce).Monokihid pesti, töötati välja Sigmafast OPD abil ja loeti Clariostar Omega plaadilugejaga.Igasse katsesse lisati kontrollidena süvendid ilma viiruseta, ilma viiruseta, kuid ilma antikehadeta ja normaliseeritud seerumid, millel oli keskmine aktiivsus.
Statistiline analüüs viidi läbi programmis GraphPad Prism (versioon 9.4.1).Andmekogumi normaalsust testiti Shapiro-Wilki testiga.Kõigi võrdluste jaoks kasutati mitteparameetrilisi kriteeriume.Paarimata proovide jaoks kasutati Mann-Whitney testi.Kõik testid olid kahepoolsed nominaalse olulisuse läviga P ≤ 0,05.
Andmestiku esialgne uurimuslik analüüs tehti R-is (versioon 4.0.3).See hõlmab Spearmani ühemõõtmelise astme korrelatsioonimaatriksi väljatöötamist, kus kahe muutuja vahelist korrelatsiooni esindab ruutude suurus ja värv.Statistiline olulisus assotsiatsioonide vahel arvutati Spearmani rho abil, kus väärtusi ≤0,05 peeti oluliseks.Võrdlused, mis ei olnud statistiliselt olulised, jäeti maatriksist välja ja märgiti tühjade lahtritega.P-väärtusi kohandati mitme võrdluse jaoks, kasutades Holmi parandust.Binaarset logistilist regressioonimudelit kasutati, et simuleerida andmestiku muutujate mõju positiivsele vastusele COVID-19-le.IFN-y T-rakkude vastused ja anti-RBD/S1/S2/N IgG tiitri skoorid muudeti teguriteks, kus iga indiviid määrati iga skoori jaoks sobivasse kvartiili.Seejärel töötati välja esialgne uurimismudel, kasutades statistikapaketi (V4.0.3) funktsiooni glm.Sellest algsest mudelist tuletatud koefitsientide suhted eraldati mudeli koefitsientidest, kasutades OddsPlotty paketi (V1.0.2) funktsiooni 'odds_plot'.Ristvalideerimismudeli väljatöötamisel kasutasime bestglm paketi (V0.37.3) funktsiooni "bestglm", et piirata kasutajate kallutatust ja tagada, et saab valida parima ennustajate alamhulga.Valitud meetod oli „täielik” ja mudeli sobivuse hindamiseks kasutatud teabekriteerium oli AIC.Koefitsientide suhte saamiseks kasutati ülalkirjeldatud sama töövoogu.
Lisateavet uuringu kavandamise kohta leiate selle artikliga lingitud loodusõppe kokkuvõttest.
Kirjad ja materjalide taotlused tuleks suunata dr Martin Scarrile või professor Andrew Godkinile.See artikkel sisaldab algandmeid.
Statistiliste mudelite loomiseks kasutatav R-kood on avalikult saadaval ilma nõudmiseta29.Kordustrükkimise teabe ja litsentsid leiate aadressilt www.nature.com/reprints.
Munro, APS et al.Seitsme COVID-19 vaktsiini ohutus ja immunogeensus kolmanda annusena (revaktsineerimine) pärast kahte ChAdOx1 nCov-19 või BNT162b2 (COV-BOOST) annust Ühendkuningriigis: 2. faasi, pime, mitmekeskuseline, randomiseeritud, kontrollitud uuring.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV jt.Ühendkuningriigis mRNA-d, viirusvektoreid ja valguadjuvantvaktsiine kasutava COVID-19 (Com-COV2) vastase heteroloogse esmase vaktsineerimise immunogeensus, ohutus ja reaktogeensus: 2. faas, üksikpime, randomiseeritud uuring, mittealaväärsustest.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, PRIA jt.COVID-19 vaktsiinide tõhusus immuunpuudulikkusega patsientidel: süstemaatiline ülevaade ja metaanalüüs.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.SARS-CoV-2 mikronivariandi B.1.1.529 vähenenud neutraliseerimine seerumiga pärast immuniseerimist.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y ja Baliser RD Läbimurdeline infektsioon SARS-CoV-2 vaktsineeritud isikutel: mõõtmine, põhjused ja tagajärjed.Rahvuslik immunoloogiapreester.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG et al.Nõrgenenud immuunne humoraalne vastus BNT162b2 Covid-19 vaktsiinile 6 kuud.N. eng.J. Meditsiin.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.Taastumis- ja vaktsiiniseerumite aktiivsus SARS-CoV-2 Omicroni vastu.Nature 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.Katari mRNA vaktsiini kaitse kestus SARS-CoV-2 Omicron BA.1 ja BA.2 alamvariantide vastu.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ et al.Mälu B-rakkude sagedus väheneb COVID-19 delta vaktsiini läbimurdelise nakatumisega.Molekulaarmeditsiin EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. jt.Ristreaktiivsed mälu T-rakud on seotud COVID-19 kontaktide kaitsmisega SARS-CoV-2 nakkuse eest.Rahvuslik kommuun.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH et al.Iseloomulikud SARS CoV-2 omikroniga reaktiivsed T-rakkude ja B-rakkude vastused COVID-19 vaktsiini retsipientidel.teadus.Immunoloogia.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu jt.Pärilikud SARS-CoV-2-spetsiifilised T-rakud tunnevad ristselt ära Omicroni variandid.Rahvusmeditsiin.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ et al.SARS-CoV-2-spetsiifiliste T-rakkude mõõtmine täisverest näitab asümptomaatilise infektsiooni ja vaktsiini immunogeensust tervetel inimestel ja tahke elundivähiga patsientidel Immunology https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.SARS-CoV-2 T-rakkude kiire mõõtmine vaktsineeritud ja looduslikult nakatunud inimeste täisveres.J. Clinical.investeerida.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU jt.COVID-19 vaktsiinivastus hulgiskleroosiga patsientidel.installida.Neuronid.91, 89–100 (2022).
Bradley RE et al.Wiskott-Aldrichi sündroomiga püsiv COVID-19 nakkus kadus pärast terapeutilist vaktsineerimist: juhtumiaruanne.J. Clinical.Immunoloogia.42, 32–35 (2022).